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用大肠杆菌表达外源蛋白,在进行超声波破碎之前,用含有1%triton-X-100的PBS悬浮,效果较好,1%triton-X-100的作用还是很明显的,对其他的一些细菌同样起作用,比如链霉菌。 细菌沉淀直接加样品1 buffer,再加5μl的巯基乙醇,混匀,离心,煮沸10min,直接上样,染色脱色步骤如下:将胶放入适量的染色液微波炉里加热1min(下次适当补点醋酸即可),将染色液换成大量的水 ...
回复(0) | 阅读(2156)| 发表于 2013-04-02 10:44:55

细胞破碎技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁的样品处理方式,使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术,是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质(产品)的基础。 结合重组DNA技术和组织培养技术上的重大进展,以前认为很难获得的蛋白质现在可以大规模生产。 细胞破碎阻力 细菌 几乎所有细菌的细胞壁都是由肽聚糖(peptidoglycan)组成,它是难溶性的聚糖链(glycan chain),藉助短 ...
回复(0) | 阅读(2003)| 发表于 2013-04-02 10:43:54

①超声波提取中的物理作用 利用超声波产生的空化现象可细化各种物质以及制造乳浊液,加速植物中的有效成分进入溶剂,使其进一步提取,以增加有效成分的提出率。还可以运用超声波的许多次级效应,如机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也都有利于使植物中的有效成分的转移,并充分和溶剂混合,促进提取的进行。 ②超声波破碎技术的生物作用 超声波能会转变为热能,可以使药物组织内部的温度瞬时升高。加 ...
回复(1) | 阅读(2768)| 发表于 2013-03-12 12:10:13

超声波由于其在传质、传热和化学反应等方面的独特作用,己成为世界各国研究的热点。特别是美、英、法、独特作用以及随着超声功率设备的研制和普及,逐渐日、俄等国在工业化方面已取得一些进展。我国的科技发展成为一门新兴交叉学科——声化学。它的发展受工作者在理论及应用方面也做了大量工作。 所谓的超声波一般是指频率范围在20k~10MHz的声波,其在化学领域的应用动力主要来源于超声空化。随着强烈的冲击波和速度 ...
回复(0) | 阅读(2097)| 发表于 2013-03-07 09:37:21

超声波对目标化学样品处理,主要利用超声空化现象。空化泡崩溃产生局部的高温、高压和强烈的冲击波及射流,为在一般条件下难以实现或不可能实现的化学反应提供了一种新的非常特殊的物理化学环境,它是一门新兴的声学与化学边缘交叉学科。大量实验证明超声波可广泛应用于各种反应,包括: (1)合成化学方面,特别是超声波催化在有机合成中应用研究发展很快,主要研究对象是多相反应,特别是有机金属。超声波使表面活化,有可 ...
回复(0) | 阅读(2210)| 发表于 2013-03-07 09:36:25

虽然样品处理不是本来的用途,但涡旋机常用来破坏样品。此方法是在管上加入研磨珠,接着重复涡旋样品,一般用来裂解微生物。涡旋机使用较大的锆及不锈钢制的研磨珠(>2mm)用来破坏较大的组织,这一点优于超声破碎对于1mm一下的组织处理效果好,可与超声破碎仪互补使用,以达到理想的破碎效果。 使用涡旋机均质样品会由于研磨珠的摩擦而产生大量的热能。许多套件需要在涡旋机上的裂缝使用冰块冷却。好几 ...
回复(1) | 阅读(2078)| 发表于 2013-02-05 13:44:38

搅拌机是早期用来做样品处理的发明之一,约于二次世界大战早期出现。此简单的装置是蛋白质纯化与分析物隔离的前期工作所使用的样品处理仪器。样品与萃取缓冲液一起放入搅拌机中,并搅拌。叶片会将组织剪切,明显的减少组织的尺寸。 优点-搅拌机都是现成的,甚至家庭用的装置也可以用在实验室的样品处理使用上。他们可以快速的处理大量样品,而且操作简单。实验室的搅拌机可以使用不锈钢材质,可减少污染并进行灭菌。 ...
回复(0) | 阅读(2182)| 发表于 2013-02-05 13:44:01

少量样品处理的回收率对一般的杵和硏砵是个挑战,100mg或甚至更少的样品会如一层粉末覆盖在硏砵上并很难回收。冷冻研磨机提供了另一个选择。冷冻研磨机本质上为一个微型杵臼,可用在非常少量的样品,达到了样品前处理所要求的结果。小型且紧密安装的杵含有少量的样品,可以让研磨后的收集更加有效。冷冻研磨机使用与标准杵臼研磨相似,于冷冻研磨机使用时,冷冻研磨机需先冷却,接着将样品加入。第二个主要不同的地方在于冷 ...
回复(0) | 阅读(2299)| 发表于 2013-01-30 10:33:27

硏砵和杵是研磨最为人所知的工具,但仍有其它工具可用在研磨来进行样品前处理。例如谷类加工厂、咖啡研磨机以及其它实验室仪器,包括涡旋机和玻璃均质机。研磨是将样品用两个硬的表面夹在中间,两个硬的表面互相摩擦。研磨可使样品撕裂、破碎,如同剪切,但不同的是,研磨会让均质机与样品直接接触,但超声波破碎仪就不同了。 不同的研磨方式可用于湿的、干燥或冷冻的样品前处理。将相对较软的样品放在两个较硬、互相摩擦的表 ...
回复(0) | 阅读(2169)| 发表于 2013-01-30 10:32:01

• 文章来源:转载   样品处理是整个分析测试过程中的一个重要环节,其目的是利用各种化学方法将待测元素从固(液)态试样中定量地以离子形式转入测试溶液。选择合理的样品分解方法,可使分析手续大大简化,使分析方法的适应性、准确性大大提高。   设计最佳样品处理的原则是:   ① 保证样品中的被测元素全部定量地转入试液,即样品分解要完全;   ② 避免样品处理过程中引入干扰元素,同时要有利于除去 ...
回复(0) | 阅读(1985)| 发表于 2013-01-23 13:15:31